Study of the potential therapeutic effect of the mesenchymal stem cells (MSCs) secretome on mammary cancer cells

Tese de mestrado em Biologia Evolutiva e do Desenvolvimento, apresentada à Universidade de Lisboa, através da Faculdade de Ciências, em 2018As células estaminais, detentoras de características únicas, têm vindo a despertar um interesse cada vez maior na investigação científica, com um potencial biológico que as torna em alvos cada vez mais apetecíveis no desenvolvimento de terapias inovadoras. Para serem definidas como tal as células estaminais têm que obedecer a três parâmetros. O primeiro consiste na capacidade para se autorrenovarem ao longo da vida, nomeadamente através de um processo de reprodução assimétrica, originando, por um lado, uma célula indiferenciada, perpetuando assim o seu carácter estaminal, e dando origem, por outro, a uma célula que se diferenciará num tipo específico. O segundo parâmetro consiste na capacidade que estas células possuem de se diferenciar num tipo celular específico, sendo que aqui a plasticidade das mesmas está dependente do seu estadio de potência. Finalmente, a definição de estaminalidade dita que estas células deverão ser capazes de repovoar o seu tecido residente em caso de lesão. É importante realçar que estas células estão presentes em nichos em todos os tecidos, embora a sua taxa de renovação seja muito variável no prisma inter-tecidual. O potencial de diferenciação de uma célula estaminal vai afunilando com o avanço do desenvolvimento embrionário. Após a fertilização, uma célula diz-se totipotente, o estado mais basal do carácter estaminal, sendo capaz de se diferenciar em qualquer tipo celular no organismo, embrionário e extra-embrionário. Aquando da formação do blastocisto, as células adquirem um carácter pluripotente, sendo comummente designadas como células estaminais embrionárias (CEE), já sem a capacidade de originar tecidos extra-embrionários mas sendo ainda capazes de originar tecidos dos três folhetos embrionários na altura da gastrulação. Com o progresso do desenvolvimento embrionário, as células sofrem ainda outra redução no seu potencial de diferenciação, designando-se neste estado como multipotentes. Contudo, existem ainda evidências de plasticidade em algumas células estaminais adultas, nas quais se incluem as células estaminais mesenquimatosas (CEM). Estas células podem ser isoladas de vários tecidos neonatais como a placenta, o saco amniótico, sangue e cordão umbilical, e adultos como a medula óssea, o fígado e o tecido adiposo. Segundo as regras estabelecidas pela Sociedade Internacional para a Terapia Celular, as CEM têm que obedecer a três parâmetros: 1) capacidade de aderência a superfícies de plástico quando em condições normais de cultura celular; 2) expressão de antigénios específicos de superfície como CD105, CD73 e CD90, e não expressão de antigénios embrionários específicos entre os quais CD45, CD34, CD14, CD11b, CD79a, CD19 e HLA classe II; 3) capacidade de diferenciação em adipócitos, osteoblastos e condrócitos, quando em condições de cultura apropriadas para o efeito. Em comparação com as CEE às quais são inerentes vários constrangimentos éticos derivados da manipulação de embriões humanos, bem como às células pluripotentes induzidas, que apresentam uma elevada instabilidade genética, as CEM apresentam-se muito atrativas do ponto de vista da sua utilização e aplicação, por apresentarem métodos de isolamento fáceis e não invasivos. Mais ainda, as CEM demonstram uma grande capacidade replicativa in vitro, que constitui um fator preponderante tendo em conta o elevado número de células normalmente requerido para procedimentos de terapia celular. As CEM têm suscitado um grande interesse do ponto de vista terapêutico, entre os quais ao nível da medicina regenerativa e toxicologia in vitro. Uma das principais características das CEM é a sua capacidade intrínseca de migrar para locais de inflamação, geralmente como resposta a redes de sinalização de citoquinas e/ou fatores de crescimento. Dotadas desta habilidade, as CEM chegam ao tecido/região lesada e aí promovem a regeneração tecidual quer através de mecanismos de diferenciação quer através da secreção de fatores parácrinos. Outra característica única das CEM é a sua capacidade para modular o sistema imunitário, tendo inclusivamente sido empregues na clínica ao nível, por exemplo, da “graft versus host disease”, na qual as células transplantadas promovem uma reação imune contra o organismo recipiente. As CEM, ao modularem a regulação de células do sistema imunitário (B, T, Linfócitos Natural Killer), permitem contornar este obstáculo inerente a várias doenças auto imunes. Curiosamente, grande parte dos efeitos terapêuticos inerentes às CEM advêm não da entidade celular por si só, ou de efeitos de diferenciação, mas sim dos fatores por elas produzidos, fatores parácrinos, comummente designados como secretoma, constituído por elevadas quantidades de proteína nomeadamente citocinas e fatores de crescimento. Este secretoma das CEM já foi responsável por efeitos de regeneração em vários modelos de doença, nomeadamente acidente cardiovascular, enfarte e regeneração de menisco. Representando entidades cada vez mais atrativas do ponto de vista da investigação científica, vários tipos de cultura celular têm sido desenvolvidos e otimizados ao longo dos últimos anos, na tentativa de maximizar o potencial terapêutico das CEM. Entre estes, a perspetiva de culturas tridimensionais das CEM tem vindo a crescer em interesse, apresentando mudanças na arquitetura celular que possibilitam uma maior aproximação àquele que é o ambiente que as células encontram em condições in vivo, em comparação com as culturas celulares em monocamada, tradicionais, as quais quando prolongadas estão associadas à perda de características celulares especificas. Quando cultivadas em 3D, as CEM apresentam tanto uma capacidade de diferenciação aumentada, como um secretoma mais rico, que se traduz, entre outros, num aumento das suas propriedades anti-inflamatórias, angiogénicas e de regeneração. Além do seu papel já provado em cenário de ferida e regeneração, a sua capacidade de migração para tumores faz ainda das CEM potenciais alvos terapêuticos para o cancro. Contudo, o seu papel neste âmbito tem-se pautado maioritariamente por trabalhos contraditórios, contrapondo estudos que evidenciam um papel anti-tumoral das CEM a outros que constatam precisamente o oposto, sendo este um tópico alvo de grande discussão na comunidade científica atual. Assim, o principal propósito deste trabalho foi avaliar o efeito do secretoma das CEM como possível terapêutica para o caso de cancro da mama. CEM neonatais humanas (CEMnh) isoladas a partir do cordão umbilical (UCX®; ECBio, PCT/IB08/54067) foram usadas para este propósito, visto terem já provado efeitos benéficos noutro tipo de doença ou lesão. Deste modo, o secretoma destas células foi produzido tanto em culturas tradicionais 2D, como em 3D, sob a forma de meio condicionado (CM2D/CM3D). Para a produção de meio condicionado 3D (CM3D), as CEM foram cultivadas em sistemas de cultura em suspensão agitados, e sujeitas a um período gradual de redução de soro, recorrendo a um protocolo previamente otimizado. As células cultivadas nesta condição formaram agregados cuja morfologia e diâmetro (< 250 μm) não sofreram alterações de maior ao longo de todo o protocolo, garantindo assim uma cultura viável e sem a presença de centros necróticos, da qual no fim foi recolhido o CM3D. Após a produção do CM2D/3D, o seu efeito foi avaliado, em primeira instância, na viabilidade de duas linhas celulares mamárias humanas: uma linha não tumoral (MCF10A) e uma linha tumoral invasiva (MDA-MB-231). Este efeito do CM (1x e 10x concentrado) foi avaliado isoladamente, e em combinação com o fármaco quimioterapêutico doxorrubicina (dox: 100 nM a 1000 nM), que constitui a primeira linha de terapêutica farmacológica contra o cancro da mama. No geral, para a linha não tumoral, verificou-se um efeito protetor significativo de ambos os CM contra a citotoxicidade induzida pela dox, particularmente no caso do CM2D/CM3D 10x concentrados. Mais ainda, esta proteção apresentou uma magnitude mais elevada no caso do CM3D (1.5x mais) quando comparado com o CM2D. Para a linha tumoral, nenhum efeito significativo adveio da aplicação do CM, apresentando-se apenas um ligeiro aumento de viabilidade celular no tratamento combinado do CM com a dox, em comparação com o fármaco sozinho. Em seguida, o efeito do CM2D/3D (1x e 10x), sozinho e em combinação com a dox (100 nM), foi avaliado na capacidade migratória da linha celular tumoral, através de um ensaio de ferida in vitro. Neste ensaio, os resultados apontaram para um aumento significativo da capacidade migratória das células tumorais, tanto no caso do CM2D como do CM3D, especialmente no tratamento com a concentração 10x. Por fim foi ainda avaliada a capacidade de invasão da linha celular tumoral através de um ensaio de quimiotaxia “transwell”, nas mesmas condições de tratamento empregues no ensaio de migração. Aqui, apesar de nenhum resultado obtido possuir significado estatístico, é possível observar a promoção de duas tendências opostas, consoante o tipo de tratamento empregue. Quando administrado sozinho, o CM manifestou uma ligeira tendência para promover a capacidade invasiva das células (10x para o CM2D, 1x e 10x para CM3D), enquanto que em combinação com a dox, o contrário foi observado. A dox, por si só, pareceu provocar um ligeiro decréscimo da capacidade de invasão celular, efeito esse que foi um pouco mais pronunciado no caso do tratamento combinado com o CM2D/3D (10x concentrado). Em suma, apesar dos resultados obtidos sugerirem alguns efeitos que apontam em diversas direções, evidenciou-se que o CM das CEMnh em estudo possui um papel protetor importante nas células não-tumorais contra a dox, o que constitui um aspeto importante num possível cenário de terapia combinada para cancro da mama, no âmbito de proteção dos tecidos saudáveis adjacentes ao tumor. Mais ainda, este efeito foi mais marcado no CM proveniente das culturas tridimensionais, demonstrando a importância crescente deste tipo de cultura em cenários inovadores de terapia celular. Contudo, mais estudos deverão ser feitos para clarificar a segurança no uso do CM das CEM para terapia em cancro da mama.Breast cancer remains one of the leading causes of tumour-related death in women, mainly due to the development of metastasis at distant sites from the primary tumour. In addition to the clinically heterogeneity of primary tumours, the heterogeneous metastatic pattern usually impairs the efficacy of the current treatments contributing to the poor prognosis of advanced breast cancer. Mesenchymal Stem Cells (MSCs) have demonstrated an inherent homing ability towards tumours that makes it an attractive novel field of research in the context of cancer therapy. However, MSCs impact in cancer is still controversial, with literature reporting both cancer promoting and inhibitory properties. Additionally, three-dimensional (3D) cell cultures have been reported as more in vivo-like, in aspects of morphology, viability and functionality, presenting also an enhanced paracrine activity with beneficial effects, for instance, in tissue regeneration. This work aimed to investigate the effect of the secretome of UCX®, a specific population of human neonatal umbilical cord matrix derived MSCs (hnMSCs), on human breast cancer. Conditioned medium from UCX® (MSCs-CM) was produced and collected from both 2D monolayer cultures (CM2D) and 3D dynamic spinner flask suspension cultures (CM3D). Cell viability/proliferation under treatment with UCX®-CM (1x and 10x concentrated) either alone or in combination with the chemotherapeutic drug Doxorubicin (Dox, 100-1000 μM) was evaluated through MTS assay in two human breast cell lines: MDA-MB-231 (malignant; invasive) and MCF10A (non-malignant epithelial cells). In MDA-MB-231 cells, a slight increase in cancer cell viability in the presence of Dox (n.s.) and CM2D or CM3D was observed; while for the MCF10A cell line both CM2D 10x (p<0.05) and CM3D (p<0.001) significantly decreased the cytotoxicity induced by Dox at 0.1 μM. Additionally, breast cancer cells’ ability to migrate was evaluated through an in vitro scratch assay when treated with CM2D/CM3D (1x and 10x), alone and in combination with Dox (0.1 μM). Herein, a significant increase in MDA-MB-231 cell capacity to migrate when treated with both CM2D and CM3D 10x (p<0.05) was observed, independently of Dox treatment. Finally, breast cancer cells capacity to invade tissues was also assessed through a coated-transwell chemotaxis assay, under the same conditions applied for the scratch assay. Results showed that, although non-significantly, both CM2D (10x) and CM3D (1x and 10x) promoted cell invasion (n.s.). Dox, on the other hand, showed a trend to reduce cell invasion ability, an effect slightly enhanced in the combined treatment with CM2D and CM3D (10x) (n.s.). In sum, although showing a trend for promoting breast cancer cells features when administered alone, the combined treatment of UCX®-CM with Dox attenuated Dox cytotoxicity in the non-tumoral cells and decreased breast cancer cell invasion capacity. Therefore, further studies are needed to better understand the underlying mechanisms of UCX®-CM in breast cancer

A música de câmara com piano produzida em Portugal: a diversidade de influências na geração nascida entre 1960/1970 e o seu reflexo na interpretação

Esta dissertação aborda uma temática relacionada com as práticas interpretativas com enfoque nos compositores portugueses pertencentes a uma geração nascida entre 1960/70 cuja característica comum reside na diversidade estilística. A geração abrangida no presente estudo postula o ecletismo técnico e estético adotado pelas ideias pós-modernistas, ecletismo este que foi analisado sob o ponto de vista do intérprete. A centralização temática deste trabalho reside ainda na música de câmara com piano e na orientação criativa dos compositores que mantêm uma ligação ao passado da música erudita ocidental, integrada nas opções da contemporaneidade musical. A análise realizada, portadora de um intuito performativo, focaliza-se na abordagem pianística e na integração do pianista no grupo camerístico, e foram selecionadas para este efeito obras de Eurico Carrapatoso, Carlos Marecos e João Madureira. Esta análise tem como objetivo a ligação entre a teorização e a sua aplicação prática, esperando-se um enriquecimento da interpretação nos recitais integrantes deste projeto. Tendo sido detetada uma forte influência do pensamento metafórico na génese das obras analisadas, foi estudado o impacto deste pensamento metafórico na interpretação. Foi também aprofundada a contextualização de cada uma das obras e a construção do seu significado interpretativo; Abstract: This dissertation tackles issues of performance practice, focusing on music genre diversity in Portuguese composers born between 1960 and 1970. This generation’s postmodern technical and artistic eclecticism is therefore addressed from a performer point of view. The crux of the present text comprises chamber music with piano of contemporary composers with a background in western art music. The resulting analytical examples consider mainly the perspective of the pianist within the ensemble. One piece from each of the following three composers is thoroughly addressed: Eurico Carrapatoso, Carlos Marecos, and João Madureira. The goal of the ensuing analysis was to establish a link between theory and practice for an agreeable performance. Considering metaphors as constant in the creative process, it was also addressed its use as a tool for performers. Some issues on context and meaning of each composition are also tackled

Mediastinitis after aorto-coronary bypass surgery

OBJECTIVES: To identify risk factors in 60 cases of mediastinitis amongst 2512 patients (2.3%) subjected to isolated coronary bypass surgery from March 1988 through December 1995, treated by a closed irrigation/drainage system. PATIENTS AND METHODS: The mean age of the 60 patients was 56.9 +/- 6.8 years (45-81 years) and 55 (91.6%) were male. Early mediastinal reexploration was performed in all cases immediately after the diagnosis of mediastinitis, with debridement of necrosed tissues, followed by implantation of a closed-circuit irrigation system of the mediastinum constituted by irrigation catheter and drain, closure of the sternum and skin, and specific systemic antibiotic therapy. The mean interval between the original surgery and reexploration was 9.4 days (range 6-14 days). No patient required more extensive procedures, namely omental or muscular flaps. Twenty potential risk factors in patients with mediastinitis, including diabetes mellitus, obesity, coexistence of peripheral vascular disease, decreased LV function, use of inotropes, mediastinal blood drainage and utilization of double IMA, were compared with the group without mediastinitis. RESULTS: Mean cardiopulmonary bypass time was 74.1 +/- 8.1 min, anesthetic time 3.5 +/- 0.8 h and postoperative mechanical ventilation 18 +/- 3 h. A total of 23 patients (38.3%) received one IMA and 35 (58.3%) two IMAs. In the postoperative period, 7 of the 60 patients (11.6%) had required inotropes because of low output. Mediastinal blood loss was 1112cc +/- 452cc and 9 patients (15%) were transfused. Cultures were positive in 40 cases (66.6%) and the most frequent infecting agent was the Staph. epidermidis in 25 cases (62.5%), followed by Candida albicans and Enterobacter and Serratia species (7.5% each); 1 patient (1.7%) died and 9 (15%) had renal failure. The irrigation/drainage was maintained for a mean of 9.1 days (5-83 days). Patients with mediastinitis had a significantly higher prevalence of diabetes (41.6% vs. 18.8%; P < 0.01), obesity (48.3% vs. 15.2%; P < 0.001), peripheral vascular disease (11.6% vs. 4.0%; P < 0.05), but a lower incidence of poor LV function (18.3% vs. 32.7%; P < 0.05). A double IMA was used more frequently in patients who had mediastinitis (58.3% vs. 23.5%; P < 0.001) CONCLUSIONS: Diabetes mellitus, obesity, co-existence of peripheral vascular disease and use of double IMA are risk factors for mediastinitis after coronary artery surgery. The efficacy of the closed method of treatment with a mediastinal irrigation/drainage system was increased with early diagnosis and reintervention

Primary left atrial haemangioendothelioma

We describe the case of a 21-year-old female patient with epithelioid haemangioendothelioma of the roof of the left atrium. The patient underwent radical resection of the tumour with large disease-free margins, which required reconstruction of left and right atrial superior walls. The prognosis is unpredictable, but life expectancies ranging from 1 to 20 years have been described. There is no single treatment that can be prescribed but, because of their biologic behaviour, epithelioid haemangioendotheliomas must be regarded as fully malignant neoplasms and ought to be resected radically to prevent metastatic disease, and to improve life expectancy and quality of life

Assessing the potential use of Water Treatment Sludge containing Activated Carbon for the removal of Emerging Pollutants

The presence of emerging pollutants (EP) in water bodies and its impacts on the environment and human health is of the utmost importance. Estrogens are a group of EP, that have a high prevalence in the environment and toxicity even at low concentrations, which leads to adverse impact in both wild and human life’s. This group include compounds such as estrone (E1), 17-estradiol (E2) and 17-ethinylestradiol (EE2). The discharge of wastewater into the environment is one of the main causes for the release of these compounds in the environment. Wastewater treatment plants are not designed to remove EP. Therefore, it is important to add complementary treatments to remove these compounds, especially with the increasing of the incentive of the reuse of treated wastewater, promoted by the United Nations (UN) Sustainable Development Goals. There are several additional treatments to accomplish EP removal. The adsorption process is one of the commonly used since it is simple to design and operate and does not generate toxic by-products. There are many kinds of adsorbent materials, however, the most used is activated carbon (AC). AC shows high removal capacity for the removal of E1, E2 and EE2. However, AC’s regeneration is an expensive process and result in a material with low adsorption capacity. As a result, efforts are being raised to find low-cost adsorbents. The use of water treatment sludges (WTSs) containing AC as an alternative adsorbent provides a new way of sustainable resources management, lining up with circular economy proposals and on another hand will contribute to the decarbonization of the water treatment industry. This work studied the potential of WTS containing AC for the removal of E1, E2 and EE2. For this purpose, WTS from two water treatment plants (WTP), St. Águeda WTS and Caldeirão WTS were characterised and tested as adsorbents. Both WTSs showed adsorption potential with efficiencies removal results above 50 %, without a significant decrease in their granulometry. For Caldeirão WTS final concentration for all the three EP were lower than the limit of quantification. As for St. Águeda WTS, the results for E1 and E2 removal were similar to Caldeirão WTS removal performance. However, for EE2 the removal efficiency was lower than the obtained with Caldeirão WTS. These results lead to a new approach in the management of this erstwhile reside and removal of EP

Surgery of chest wall deformities

OBJECTIVE: To evaluate the medium-term results of 77 surgical corrections in patients with chest wall deformities, 53 (68.8%) with pectus excavatum and 24 with pectus carinatum, operated upon from 1985 to 1994. METHODS: The mean age of the patients was 14.7 years (4-39 years) and 77% were younger than 15 years of age. There were 59 male (76.7%) and 18 female patients. Only four had a family history of the malformation. Seven patients (9.1%) presented with asthma-like symptoms, and 13 (16.9%) referred dyspnea and tiredness for small efforts. The remainder (74.2%) were asymptomatic, but most were psychologically disturbed by the deformity and postural abnormality. Two patients had other skeletal abnormalities. The modified surgical technique used in all cases consisted of subperichondrial resection of the abnormal costal cartilages, transverse and longitudinal osteotomies of the sternum and internal stabilization with a steel rod which was generally removed between 6 and 12 months postoperatively. RESULTS: There was neither early nor late mortality. One patient had a pneumothorax which required chest tube drainage. The mean admission time was 10.5 days (8-14 days). Follow-up was complete, and 90% of the patients had increased effort tolerance. Five of the seven patients (72%) with 'asthmatic' symptoms showed a decrease in the frequency of the crises. Two patients had recurrence of the depression by 3 and 8 months, respectively. The remaining 75 patients (97.3%) were satisfied with the cosmetic result of the surgery. CONCLUSIONS: Surgical treatment of chest wall deformities using this technique leads to good cosmetic, orthopedic and psychological results. We believe that the operations should be performed at any age in patients who have at least a moderate deformity

Surgery for pulmonary aspergiloma: curative?

Introduction.In lhe last few decades, there has been an increase in fungal diseases, especially in those caused by Aspergillus.The aim of this retrospective study was to confirm or ascertain whether surgical intervention to pulmonary aspergiloma can result in a cure or long term palliative treatment with improvement of quality of life. Methods and materiais. From 1989 to 2001, 23 patients with mean age of 44.1 years (18-69 years) were submitted to pulmonary surgery for excision of aspergilloma. Sixteen patients were mate (70%). The most frequent indication for surgery was haemoptysis in 16 patients (70%) followed by abundant sputum in 3 patients (3%). Four patients (17%) were asymptomatic. Old tuberculosis lesions (87%) or pulmonary abscesses (13%) were lhe basic conditions for lhe aspergilloma. Pre-operative evaluation of respiratory function showed a mean vital capacity of 69.8% (61-84% limits) and lhe mean Fevl was 66% (53-82% limits). Results. This group of patients were submitted to 18 lobectomies (82%), 2 bilobectomies (7%), 2 wedge resections and 1 pneumonectomy (4%). There was no operative mortality and lhe morbidity in lhe post-operative period was: persistent air leak in 7 patients (30%), post-operative bleeding in 2 patients (7%) and residual cavities in 2 patients (7%). The mean time of follow-up was 7.2 years (limits 1.5-14 years) and 3 deaths were registered. Two deaths were related to intestinal neoplasia and 1 related to lhe original disease, 5 years after surgery. All surviving patients referred good improvement of symptoms and quality of life. Conclusions. The resection of pulmonary aspergilloma could be performed with a low morbidity and mortality. The patients referred good improvement of symptoms and quality of life after surgery. Consequently, we suggest that surgical therapy is an option for both symptomatic and asymptomatic patient

Aprender a cidade. O Portfólio como instrumento de aprendizagem na Geografia do 8º ano de escolaridade

O presente Relatório de Prática de Ensino Supervisionada enquadra-se no Mestrado em Ensino da Geografia no 3.º Ciclo do Ensino Básico, e no Ensino Secundário e pretende apresentar a prática profissional ocorrida na escola EB23 de Bobadela (Loures) com uma turma do 8.º ano do Ensino Básico. A prática profissional desenvolvida incide sobre a lecionação de “Principais áreas de fixação humana” inserida no tema “População e Povoamento”. Para potencializar a abordagem das cidades implementou-se o portfólio, constituído por fichas didáticas, durante as aulas, como instrumento de aprendizagem com o objetivo de promover aulas de Geografia mais práticas, adaptando-as, assim, às caraterísticas da turma. Como se referiu, pretendiam-se aulas mais práticas, uma vez que no início do ano letivo, quando os alunos foram confrontados com a questão “Qual as disciplinas preferidas?”, nenhum referenciou a disciplina de Geografia. Um outro objetivo que se pretendeu alcançar foi o de estimular o sentimento de compromisso e autonomia através da necessidade de manter o portfólio com as atividades propostas realizadas, sendo também um instrumento em que os alunos puderam analisar a sua evolução ao longo do tempo. Para além de dinamizar a utilização do portfólio, foram também implementadas outras estratégias de ensino-aprendizagem, como trabalho em grupo, uma visita de estudo virtual e trabalho de campo. Com o objetivo de apoiar e facilitar a aprendizagem dos alunos, foram utilizados diversos recursos didáticos como a observação de imagens e vídeos, a exploração do Google Maps e do Google Classroom, a utilização do quadro e do manual. No final, foi aplicado um teste de avaliação sumativa relativamente à aprendizagem sobre as cidades. Com a introdução do portfólio testemunhou-se uma melhoria das notas e da prestação dos alunos com um menor aproveitamento e com piores resultados, aqueles com mais dificuldades escolares e que se sentiram, assim, mais “acompanhados” no seu trabalho escolar. Observou-se, ainda, que os filhos de pais com maior formação académica tiveram melhores resultados.This Report on Supervised Teaching Practice is part of the Masters in Geography Teaching in the 3rd Cycle of Basic Education, and in Secondary Education and intends to present the professional practice thar took place at the EB23 school in Bobadela (Loures) with a class of 8st year of Basic Education. The professional practice developed focuses on the teaching of “Main areas of human settlement” inserted in the theme “Population and Settlement”. To enhance the approach to cities, a portfolio was implemented, consisting of didactic sheets, during classes, as a learning tool with the aim of promoting more practical Geography classes, thus adapting them to the characteristics of the class. As mentioned, more practical classes were intended, since at the beginning of the school year, when students were confronted with the question “What are your favorite subjects?”, none mentioned Geography. Another objective that was intended to be achieved was to stimulate a feeling of commitment and autonomy through the need to maintain the portfolio with the proposed activities carried out, also being an instrument in which students could analyze their evolution over time. In addition to boosting the use of the portfolio, other teaching-learning strategies were also implemented, such as group work, a virtual field trip and fieldwork. In order to support and facilitate students' learning, various teaching resources were used, such as observing images and videos, exploring Google Maps and Google Classroom, using the board and the manual. At the end, a summative assessment test was applied regarding learning about cities. With the introduction of the portfolio, there was an improvement in the grades and performance of students with lower grades and worse results, those with more academic difficulties and who, therefore, felt more “accompanied” in their schoolwork. It was also observed that the children of parents with more academic training had better results

A importância da implantação da Diretiva RoHS nos diversos processos industriais

Orientador : Renato EspañaArtigo (especialização) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Sociais Aplicadas, Curso de Especialização em Gestão da QualidadeInclui referênciasResumo : Existe hoje no mundo uma crescente preocupação com o consumo de produtos que possam conter metais pesados nocivos ao meio ambiente e a saúde humana. Partindo deste princípio, em junho de 2006, entrou em vigor nos países pertencentes a União Europeia a Directiva RoHS, qual exibe uma lista, estabelecendo padrões e limites para uso de metais pesados em aparelhos eletroeletrônicos novos que entrem em seus países. Neste artigo, será evidenciado através de revisão bibliográfica o quão perigosos são os metais previstos na Directiva RoHS e ressaltar como é importante o Brasil adotar esse processo de fabricação mais limpo, não somente para aparelhos eletroeletrônicos, mas também para outros segmentos industriai